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TACO

  • taco核酸提取系统的原理为何?
    taco核酸自动提取仪采用磁珠分离的原理,可以于50分钟内,于均质的组织液中,以极高的效率回收高纯度、高完整性的核酸。
    磁珠的制作采专利制程,首先将硅薄膜均匀的镀于磁珠表面,之后藉由硅薄膜在高盐环境下对于核酸的吸附力,将核酸与其它成分分离。主要的步骤如下:
    1. 均质样品:可藉由研磨、均质器、或是taco-Prep自动均质机,将样本磨碎至均质状态。
    2. 均质磁珠:以下步骤皆由taco核酸自动提取仪自动进行
    3. 破碎细胞/与磁珠混合:由硅薄膜吸附细胞破碎后所释放出的核酸
    4. 清洗磁珠:将其它非核酸的物质去除
    5. 核酸回收:将核酸于低盐状态下自磁珠上洗出
  • taco核酸提取系统所用的磁珠与其它厂牌的磁珠有何不同?
    本技术采用专利的微米磁珠颗粒,具备与其它厂牌磁珠不同的特性:
    1. 微米颗粒较一般传统磁珠大,需专利技术成型

    2. 大颗粒磁珠导致硅薄膜镀膜均匀且表面平滑,因此核酸吸附力强,吸附时立体干涉少,且易于冲洗回收,不需要如同

    其它厂牌必须加热才能有效回收核酸

    3. 大颗粒不易因为组织粘黏,而导致磁珠结块,造成的回收率下降
    4. 大颗粒磁珠于与组织液共同混合时,有助于细胞破碎
    5. 易于被磁棒吸取与放回
    6. 质量稳定,大小均匀,磁珠完全被硅膜附盖,于保存时不易氧化
  • taco核酸提取系统所纯化出的核酸的质量如何?
    taco核酸提取系统所纯化出的核酸具有以下的特性:
    1. 回收率高
    2. 完整性高
    3. 纯度高
    4. 使用範圍广
    因为上述的数据会随着样本的性质与保存方法而改变,因此在方法评估时,建议以平行比对的方式,即可对照出taco核酸提取系统的优越性。 如需要相关的数据或是数据左证,请联系我们,我们将提供利用全血做为检体的验证与验效数据。
  • 请问可以使用taco核酸提取系统所提取的核酸从事体外检验的用途吗?
    必须依使用地区,以及该地体外检验(in vitro diagnosis, IVD)医疗器材相关法规的规定而决定。因为taco核酸自动提取仪质量精良,回收率高,研发、生产、与销售过程都符合ISO13485:2003质量系统规范,本系统现已取得台湾医疗器材查验登记、欧盟CE-IVD认证、以及美国FDA医疗器材登录。因此在上述区域可以用在体外检验的用途。
  • 请问有相关的文献认证或是知名单位使用taco核酸提取系统?
  • taco核酸提取系统是否可以使用其它厂牌的磁珠?
    不建议。taco核酸提取系统的条件完全是依据本身的专用磁珠进行优化,其它厂牌的磁珠在大小、磁性、吸附力、稳定性的各方面都与taco专用磁珠有一段差距,并不适于直接使用在taco核酸提取系统上。
  • 是否可以将taco系统所用的试剂用于其它厂牌的核酸自动提取系统之上?
    如果其它厂牌的核酸自动提取系统同样是采用磁珠的原理时,有机会可以使用taco的磁珠与试剂。不过因为厂牌间的差异大,仍需要进行优化的动作。。
  • taco核酸提取系统是否一定要使用taco专属耗材?
    是的。每一家厂牌之间的耗材都有尺寸上的差异,必须要使用专属耗材才可以避免碰撞所造成机器损坏,和降低交叉污染的机会。
    为了避免耗材的误用,taco核酸提取系统设计了数道防止人为失误的机制,如反应盘右上角的斜角设计,与磁棒八爪套的固定勾设计等,都可以避免不同厂牌间耗材的误用。
  • taco核酸提取系统如何避免批次间的污染?
    首先必须确定每一次都是使用全新的耗材。taco核酸提取系统所提供的耗材都是设计为一次性的使用,绝对不可以于清洗后重复使用。 其次,必须确认每一次反应时磁棒都有被八爪套保护。
    于反应结束时,将96孔盘与磁棒八爪套取出时必须要缓慢小心,以避免碰撞所导致的液体喷溅或是倾倒。
    最后,可于取出96孔盘与八爪套后开启紫外光,针对机器内部进行杀菌除污的动作。
  • taco核酸提取系统如何避免批次内的交叉污染?
    taco核酸提取仪动作精准,如依照使用说明书建议事项操作时,不应发生批次内交叉污染的情形。但是使用者仍应小心操作,避免以下情况发生:
    1. 因碰撞导致的内机构定位失准,请联络原厂代理商进行定位校正与维修
    2. 使用未经均质化的样本检体,此时块状检体有机会于磁棒运动过程中碰触到相邻的区域而导致污染

    3. 试剂体积未依说明书建议量添加:体积过大时会造成液体的喷溅,体积过小时会造成磁珠的残留与拖曳,都有可能造成

    交叉污染

    4. 耗材未就定位:端务必确认于装设96孔盘时有推到底,于装设磁棒八爪套时定位勾有卡到勾槽中
  • taco核酸提取系统的机械行动原理为何?
    taco核酸自动提取仪利用超精密螺杆,进行定位与磁棒移动的动作。使用螺杆的等级,精密度可达0.05毫米,为台湾精密工业技术水平的具体展现,因此可以准确的执行磁棒的移动,避免其它厂牌利用皮带传动所造成的位移,与此种位移所导致可能的交叉污染的情形。
  • taco核酸提取系统为了保护用户所设计的安全措施有那一些?
    taco核酸提取系统的安全设计共有以下几种:

    1. 开门感知:内建开门感知器,当机门开启时,机器一率暂停所有动作,除开/关门键外,其他按键一率停止作用,同时如

    紫外光是开启时也会自动熄灭。如此可以避免使用者在机门开启下因误触按键所造成的伤害。

    2. 防夹机门:机门动作缓慢,同时当接触到阻碍物时,即会自动升起,以避免夹手

    3. 紫外光启动限制条件:当机器处于启动状况、机门开启时、或是暂停时,紫外光都无法打开。换过之,唯有在机器处于

    待机状态,同时机门关闭时,紫外光的启动键才有作用。

    4. 紫外光自动计时功能:于开启30分钟后即自动熄灭

    5. 暂停步骤限制:在磁珠吸取步骤时,为避免磁棒与八爪套因暂停分开所导致的磁珠散落而造成污染,因此限制此时的

    暂停。当于这个步骤按下暂停键时,机器会在此一步骤结束后再予暂停。

  • taco核酸提取系统适用于那些检体/样品的核酸提取?
    新鲜的动植物组织,血液 – 不论是全血还是血清或血浆,细菌或是病毒的培养液,细胞培养液,或是上述经由妥善保存的冷冻检体,酒精浸泡检体,固定组织或是血片等,在经过适当的均质化之后,都可以使用taco核酸提取系统进行核酸提取。
    均质液可为taco试剂中的Lysis Buffer,或是PBS。
  • 可以将未经过均质化的样品组织直接进行taco核酸提取吗?
    除了本身已经是处于均质状态下的检体,如血液或培养液之外,为了取得最佳的核酸提取效果,以及避免可能的交叉污染,建议都应该先进行均质化的前处理。
  • 搭配taco核酸提取系统的试剂套组有那些?
    目前搭配的萃取试剂套组共计有以下四种,详细的数据请参考「taco核酸自动提取相关套组」页面。
    1. DNA提取套组 – 台湾医疗器材查验登记、欧盟CE-IVD认证
    2. DNA/RNA共同提取套组
    3. 植物核酸提取套组
    4. 质体核酸提取套组
    使用者可以依据自己的需求,选择合适的试剂组进行实验。
  • 使用taco核酸提取系统有那些限制因素?
    有的,在使用的样品部份有以下的限制:
    1. 不当的样品的保存状况:样品本身保存条件不佳,如经过多次解冻结冻的冷冻检体
    2. 不當的保存方法:樣品採用會破壞核酸的保存方法,如保存在福馬林中的組織,或是被Davison溶液固定的組織
    3. 过于黏稠的样品:如未经液化的痰液
    4. 选择不当的试剂组:如选择taco DNA/RNA共同提取套组进行植物组织的核酸提取
    5. 样品含有过多的抑制物:如使用肝素(heparin)做为抗凝血剂的血液

    在操作的环境与人员应注意下列几点:
    1. 不应放置于具污染源的区域,如电泳室
    2. 应有稳定的电源供应,或是架设不断电系统UPS
    3. 环境温度应介于10 – 40度之间
    4. 必须使用taco专用的试剂与耗材
    5. 人员必须经过基本的操作说明与训练
  • 在使用taco核酸提取系统时,我不小心把磁棒弄断了,可以修理吗?
    请先联络原厂代理商进行维修。如所在区域偏远,服务人员不易到达,或是急需使用时,可依以下步骤先自行处理:
    1. 确认磁棒的磁极:机器内所有磁棒的磁极都应是同一方向,可将脱落的磁棒与其它作固定住的磁棒接近以进行磁极确认
    2. 去除磁棒与钢柱表面的残胶
    3. 利用快干胶/三秒胶将磁棒黏回
    4. 待一小时后再使用
  • 当我在使用taco核酸提取系统时,不小心将试剂装错位置,请问核酸还能够用吗?有什么补救的措施?
    原则上是不应使用,并且建议重新提取。
    如果是冲洗液(Elute buffer)放错,则一定无法使用。
    如果是清洗液(Wash buffer)A、B放置颠倒,则会造成回收核酸内的盐浓度太高,可藉由酒精沉淀改善。
    如果是磁珠的位置由well 2放成well 1,则会影响回收率,可藉由回收核酸的OD量测决定是否可以使用。
    如果是属于其它的位置放错,请与我们的技术人员联络,共同讨论补救措施。
  • 当反应完成后,在well 6及well 12(全部或部份)未看到任何elute出来的液体,请问是什么问题?
    有以下三种可能:

    1. 忘记于well 6及well 12中添加冲洗液(Elute buffer),此时一定会伴随着well 6及well 12中大量的磁珠残留,因此不难

    判别。

    2. 冲洗液回收残留于管壁:请检查是否残留在管壁之上。因为回收的核酸溶液浓度高,与管壁间的吸附力变强,因此当

    磁珠冲洗完成后要将其吸走时,一并将溶液带至管壁。

    3. 原始样本添加量超过冲洗液的负荷:如果确定不是上述1、2的原因,则应将方向锁定在样品添加量过高。改善的方法有

    以下两种:

     i. 减少样品的添加量,到原始的一半左右
     ii.增加冲洗液(Elute buffer)的量,由50微升提高至100微升
  • 在反应完成后发现有大量的磁珠残留,请问是什么原因?
    首先定义大量残留。当发现磁珠明显于管壁拖曳,或是某些孔底部的磁珠量已足以附盖该孔1/3以上的面积时,称为大量残留。一般而言有以下两种可能:
    1. 某一孔(或一排)未加应有的试剂
    2. 机器内部机构定位走位
    因此首先请重新执行一次核酸提取,并确认所有试剂都有依说明书的指示添加。如果残留问题解决,表示问题来自1。如果仍有大量磁珠残留,表示问题来自2,此时请与原厂代理商联络,以进行定位校正与维修工作。
  • 在反应完成后发现某些孔底部有少量磁珠残留,请问是什么原因?
    首先定义少量残留。当发现磁珠于反应完成后残留于某些孔底部,而磁珠量不足以附盖该孔1/3以上的面积时,称为少量残留。
    磁珠少量残留属于正常现象,一般而言无需特别处置,唯当有以下三种情况发生时,仍应特别注意:

    1. 回收量不足:有时因为磁珠残留,造成磁珠量不足,影响最终的核酸回收量。因此当发现有残留时,在量测OD应特别

    留意,以确定回收之量是否足以应付后续实验。

    2. 残留位置固定:在经过数次观察,发现磁珠总是残留在某些特定的孔位时,表示机器内部机构的定位已有可能发生位移

    ,此时请与原厂代理商联络,以进行定位校正与维修工作。

    3. 核酸将用于光学反应:残留的磁珠一般不会影响后续的分子生物反应,但是当磁珠是残留在well 6或是well 12,也说是

    冲洗液回收的位置时,在吸取核酸溶液仍应小心,尽量不要吸到磁珠。特别是如果后续反应有涉及到光学,例如real-time PCR的荧光反应,磁珠就有可能会影响到光学信号。

  • 反应完成后我才发现忘记装磁棒的八爪套,结果磁棒上到处都是磁粉,请问应该如何清理?本次提取的核酸还能够用吗?
    核酸当然是不能用了,必须重新提取。
    磁棒则请依照以下的步骤逐步清洁:
    1. 将电源打开,机门打开,以泡棉或合适大小的物品(如竖立之96孔盘)将机门卡住,保持在开启的状况
    2. 关闭电源
    3. 将上托盘(磁棒托盘)向下拉至与下托盘(八爪套盘)靠近
    4. 以棉花棉沾酒精,磁棒间以由内而外的顺序,每一根磁棒则以由上往下的方向擦拭直到目视没有磁粉为止
    5. 取出卡住机门之物品,缓缓放下玻璃机门
    6. 打开电源,由机器自动重新定位
    7. 开启紫外光,进行内部杀菌除污
  • 在反应前好像磁棒八爪套未能卡紧,因此在反应一半的时候卡住,同时发生巨大的声响,请问应该如何因应?

    机器会坏掉吗?

    首先请立刻关闭电源,并依照以下的步骤处理:
    1. 用手将机门向上打开,以泡棉或合适大小的物品(如竖立之96孔盘)将机门卡住,保持在开启的状况
    2. 移动上托盘(磁棒托盘)与下托盘(八爪套盘),分开磁棒与八爪套,并将八爪套取出
    3. 取出96孔盘,本次核酸提取需重做

    4. 目视可能的损坏情形,如磁棒掉落,托盘歪斜等。如有明显的损坏,请立刻与原厂代理商联络,以进行定位校正与维修

    工作。

    5. 如果目视没有问题,则请放置空的耗材 – 96孔盘与磁棒八爪套进入,并确定都已到达定位点
    6. 取出卡住机门之物品,缓缓放下玻璃机门
    7. 打开电源,由机器自动重新定位
    8. 按下启动键,测试功能是否正常。
    如果过程中有任何机构卡住,发出巨大声响,或是不正常的状况,请立刻与原厂代理商联络,以进行定位校正与维修工作。
  • 在反应前好像没有把96孔盘推到底,因此在反应一半的时候卡住,同时发生巨大的声响,请问应该如何

    因应?机器会坏掉吗? 要如何避免?

    处理步骤与Q23相同。
    此两种状况都有机会造成机器的具大损伤,应于日常使用上全力避免发生。因此请于按下启动键之前,必定做到以下的检查动作:
    1. 检查96孔盘是否有就定位,是否有推到底?
    2. 检查磁棒八爪套是否有装?是否有将八爪套的定位勾卡到下托盘的勾槽中?是否有轻拉八爪套以确定卡勾稳固?
    3. 是否96孔盘中应该添加试剂的孔位都有添加到?
  • 上次使用的时候一切都还正常,可是这次一开机就产生巨大噪音,很吓人,请问是机器坏掉了吗?
    当发生上述现象时,代表内部机构的定位已经不正常,请依以下步骤处置:
    1. 关闭电源
    2. 用手将机门向上打开,以泡棉或合适大小的物品(如竖立之96孔盘)将机门卡住,保持在开启的状况
    3. 将上托盘(磁棒托盘)与下托盘(八爪套盘),分别向下拉动1公分左右
    4. 取出卡住机门之物品,缓缓放下玻璃机门
    5. 打开电源,由机器自动重新定位
    6. 按下启动键,测试功能是否正常
    如果过程一切顺利,代表机构已经重新取得正常定位,机器仍可使用。如果过程中有任何机构卡住,发出巨大声响,或是不正常的状况,请立刻与原厂代理商联络,以进行定位校正与维修工作。
  • 在取出96孔盘的时候不小心弄洒了,请问应该如何清理内部?
    taco核酸提取系统的内部表面采用镜面不锈钢处理,或是铝合金阳极处理,非常容易清理。在清理时先以不会掉落纤维的吸水材质布或纸将表面的脏污擦拭,如果有擦不掉的地方再以少量清水加上述的布或纸,或是沾水棉花棒擦拭。请不要用清洁剂,特别是含氯的漂白水类清洁剂,以及有机溶剂如酒精擦拭。
    擦拭时请关闭电源,再以手将机门向上打开。擦拭完成后可再开启紫外光进行杀菌除污的工作。
  • taco核酸提取系统所提取的核酸在定量上应注意事项有那些?
    核酸定量主要是量测吸收光谱于波长260nm处的读值,对于磁珠系统而言,会有波长320nm的背景值,因此在计算浓度时必须要将其还原。也就是不能够直接利用OD260计算,而是应该要用(OD260 – OD320)进行计算。
    在纯度的评估时,同样的也不可以直接用OD260/OD280的比值,而是应该要用(OD260 – OD320)/(OD280 – OD320)的比值进行评估。
  • 可以更改taco核酸提取系统的程序吗?
    不可以。taco核酸提取系统为了用户方便,采用封闭式单一程序设计,适用于所有搭配的taco专用试剂组,无需程序修正。
  • 如果我只要高纯度的RNA,可以使用taco核酸提取系统吗?应该搭配那一种试剂套组?
    可以,应该选择taco DNA/RNA共同提取套组。并于提取程序完成后,再行添加不含RNase的DNase I进行DNA消化反应。反应条件则应参考厂商所提供的DNase I的产品说明。之后可以利用离心管柱纯化,或是依照酚/氯仿(phenol/chloroform)纯化,再酒精沉淀的步骤回收RNA。
  • 在核酸总量极小的状况下,也可以使用taco核酸提取系统吗?
    可以,例如使用血清检体检验C型肝炎时,病毒量往往不多,传统的方法甚至还需要添加如肝醣之类的化合物藉以提升回收率。对于一般磁珠的系统而言,这种检体的挑战相当高,再现性也不佳,最主要是因为硅薄膜的可吸附位置几乎都是空的,核酸在冲洗时很容易又会再黏回磁珠,造成冲洗的效率成为机率的问题。
    taco系统的磁珠较其它厂牌大,表面光滑易于冲洗,且不易受到血清中其它成分的影响,因此效果会比其它的磁珠系统佳。但是不论如何,使用者都必须了解核酸总量极小的这种客观条件,对于任何的核酸提取系统都是极大的考验。

Q&A问题